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2020-04-02
鸡场球虫病调查

球虫病是一种主要由艾美耳属球虫引起的呈世界性分布、严重危害养鸡生产的主要鸡病之一。目前已被美国农业部列为对禽类危害最严重的五大疾病之一。在各种鸡病 中, 球 虫 病 的 发 生 率 最 高, 占1/6 ~ 1/5,常呈暴发性流行。它对养鸡生产的危害十分严重,15 ~ 50日龄的雏鸡发病率最高,死亡率可高达 80%。球虫病流行的鸡群生长严重滞后,而且会诱发其他疾病,如大肠杆菌病、支原体病等。成年鸡多为带虫者,增重和产蛋受到一定影响。耐过的病鸡,长期不得康复,生长发育受到严重的影响。一些感染鸡群不产生明显的临床型球虫病,造成的隐性感染所带来的损失可能更大。据统计,我国每年用于防治鸡球虫病的药费达数亿元人民币,占鸡病全部防治费用的近三分之一,而全球养禽业每年因为球虫病造成的损失高达数十亿美元。一、材料与方法粪样采集 笔者以群体采样法,在常州某畜禽有限公司 5 个养鸡场不同的点采集粪便 ,每个粪样重 100 ~ 200 g,共采集 5 个鸡群 5 个粪样,按时间分两次采样,总计 10 个样品。第 1 次采样鸡群日龄 20 ~ 30 d,鸡群大小 1 ~ 2 万只,共 7.7 万只鸡 ;第 2 次采样鸡群日龄 40 ~ 50 d,鸡群大小 1 ~ 2 万只,共 7.7 万只鸡。卵囊计数 每 个 样 品 取 2 g 粪 便, 加 入10 ml 水搅拌均匀 , 再加入 50 ml 饱和盐水,过滤至小试管中 , 滴一滴 至麦克马斯特氏计数板 , 显微镜下观察每克粪便中球虫数量。卵囊分离与培养 将粪样分别置于干净的小烧杯中,再加入适量的清水搅拌均匀,分别经 60 目铜丝筛和 260 目尼龙筛过滤,倒去粪渣,将滤液按照水洗沉淀法反复洗涤,倾去上清得到沉淀。沉淀中加入等量的 3% ~ 5% 重铬酸钾,放入 29℃的恒温箱中培养,经常晃动,使有充分的氧气孢子化,培养 3 ~ 5 d 使之孢子化。初次种类鉴定 取其培养后的卵囊加入离心管中,在 2 000 rpm下离心 10 min,使卵囊沉淀,倾弃全部重铬酸钾溶液,再加清水重新离心一次,倾弃全部上清液得沉渣,加饱和食盐水入离心管中近满,搅动管底的沉渣,静置 3 ~ 5 min 后,再在 2000 rpm下离心 5 min,沉渣中卵囊即漂浮至液面,再向离心管中加饱和食盐水至管内液面稍凸起,盖上盖玻片,立刻取下以湿面盖在载玻片上,在10×10 或 10×40 的镜下详细观察每种球虫卵囊的形态结构特征,测量卵囊大小,并用 JVC 显微摄影机及显微细胞图象处理系统软件拍摄卵囊图片。回归动物试验1. 实验动物。 1 日龄健康出壳的苏禽黄羽肉鸡,在无球虫环境中饲养,其饲料和饮水中也无球虫污染且无抗球虫药。饲养到 20 日龄时,进行卵囊接种试验。2. 卵囊接种。 收集的卵囊经培养孢子化后,以每个鸡场 2 次采样的卵囊为一组,混合接种 20 日龄的黄羽雏鸡 6 只。3. 粪检卵囊。 接种 90 h 时收集粪便,检查是否有卵囊,此时检测出来的卵囊为早熟艾美耳球虫。接种 96 h 收集粪便,检查是否有卵囊,此时检测出来的卵囊为和缓艾美耳球虫。接种 109 h 收集粪便,检查是否有卵囊,此时检测出来的卵囊为堆型艾美耳球虫或和缓艾美耳球虫。4. 肠 道 黏 膜 分 段 检 查。 在120 h 与 144 h 分别剖杀,观察病变、虫体寄生部位与特征并拍照。剖杀时每只鸡取其肠道,按不同的肠段分离后,各置于小烧杯中,加入适量水剖开肠道,肠内容物及肠道黏 膜稍研磨后经铜筛漏斗过滤,滤液静置 1 h ~ 2 h 后倾去上清夜,沉渣中加入等量的 3% ~ 5% 重铬酸钾,放入 29℃的恒温箱中培养,经常晃动,使有充分的氧气孢子化,并视情况滴加 2.5% 重铬酸钾防止干涸,培养 3 ~ 5 d 后待检。二、结果鸡场感染球虫的克粪卵囊数鸡场感染球虫的克粪卵囊数见表 1,可见 5 个鸡场在前后两次的克粪卵囊数变化不尽一致, 其中杨某、张某和顾某的鸡场的克粪卵囊数降低,袁某的鸡场的克粪卵囊数增加,王某的鸡场卵囊数变化不大。图片 1结果1. 球虫种类。 经观察鉴定和回归动物试验后验证,该公司部分鸡场流行的鸡球虫种类有 :柔嫩艾美耳球虫、毒害艾美耳球虫、堆型艾美耳球虫、巨型艾美耳球虫、和缓艾美耳球虫、早熟艾美耳球虫和布氏艾美耳球虫。2. 感染率。 经统计分析,柔嫩艾美耳球虫、堆型艾美耳球虫、巨型艾美耳球虫与和缓艾美耳球虫的感染率分别为 100%,毒害艾美耳球虫的感染率 20%,布氏艾美耳球虫的感染率 20%,早熟艾美耳球虫的感染率 20%。柔嫩艾美耳球虫、堆型艾美耳球虫、巨型艾美耳球虫与和缓艾美耳球虫为优势种。三、分析与讨论 本次调查采用观察卵囊形态特征与回归动物试验后肠道病变相结合的方法,对该公司部分鸡场进行了种类调查,根据结果分析其原因 :在不了解鸡场流行球虫种类的情况下该公司鸡场在雏鸡 4 日龄时免疫鸡球虫疫苗,引进了本来没有的球虫株 ;球虫药物的滥用,导致球虫耐药性的产生,使得球虫对药物的敏感性降低,最终导致球虫的暴发。